免疫组化技术主要包括直接免疫荧光法、间接免疫荧光法、酶标记法、免疫金标记法等方法，不同方法适用于不同的检测需求。实际应用中需根据样本类型、检测目标及实验条件选择合适的技术手段。
1、直接免疫荧光法
该方法将荧光素标记的一抗直接与组织或细胞中的抗原结合，通过荧光显微镜观察信号。其操作简便、特异性强，常用于肾活检、皮肤免疫病理检测中抗原的定位，例如IgA肾病中IgA在肾小球沉积的检测。
2、间接免疫荧光法
使用未标记的一抗与抗原结合后，再用荧光标记的二抗进行信号放大。这种方法敏感性更高，广泛应用于自身抗体筛查，如抗核抗体检测中Hep-2细胞基质的荧光模式分析，可检测系统性红斑狼疮等疾病。
3、酶标记法
通过辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记抗体，与底物反应产生显色信号。该技术无需荧光显微镜，普通光学显微镜即可观察，常用于病理诊断中乳腺癌HER2蛋白、肺癌PD-L1等肿瘤标志物的检测，具有染色结果可长期保存的优点。
4、免疫金标记法
采用胶体金颗粒标记抗体，通过银增强技术放大信号，适用于电镜观察和免疫印迹实验。在神经病理学研究中常用于突触蛋白的精确定位，其高电子密度特性使超微结构层面的抗原可视化成为可能。
进行免疫组化检测时需注意组织固定、抗原修复等预处理步骤对结果的影响。不同检测系统存在灵敏度差异，建议在病理医师指导下选择适宜方法，实验过程中需设置阳性和阴性对照以确保结果准确性。